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安捷倫色譜柱使用緩沖鹽的具體方法

 更新時(shí)間:2018-08-22 點(diǎn)擊量:886
   安捷倫色譜柱老化的方法通常是將色譜柱升至一恒定溫度,通常為其溫度上限。特殊情況下,可加熱至使用溫度之上約10~20℃左右,但是一定不能超過(guò)色譜柱的溫度上限,那樣極易損壞色譜柱。
  
  當到達老化溫度后,記錄并觀(guān)察基線(xiàn)。初始階段基線(xiàn)應持續上升,在到達老化溫度后5~10分鐘開(kāi)始下降,并且會(huì )持續30~90分鐘。當到達一個(gè)固定的值后就會(huì )穩定下來(lái)。如果在2~3小時(shí)后基線(xiàn)仍無(wú)法穩定或在15~20分鐘后仍無(wú)明顯的下降趨勢,那么有可能系統有泄漏或者污染。遇到這樣的情況,應立即將柱溫降到40℃以下,盡快的檢查系統并解決相關(guān)的問(wèn)題。如果還是繼續的老化,不僅對安捷倫色譜柱有損壞而且始終得不到正常穩定的基線(xiàn)。
  
  另外,老化的時(shí)間也不宜過(guò)長(cháng),不然會(huì )降低色譜柱的使用壽命。一般來(lái)說(shuō),涂有極性固定相和較厚涂層的色譜柱老化時(shí)間長(cháng),而弱極性固定相和較薄涂層的色譜柱所需時(shí)間較短。
  
  正確使用安捷倫色譜柱緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出,因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結為一句話(huà):使用前要過(guò)濾,使用后要沖洗。具體方法如下:
  
  1、等度條件:使用緩沖鹽前和使用后需用過(guò)渡流動(dòng)相以1.0ml/min流速沖洗60min;使用后去除緩沖鹽的另一個(gè)方法是用過(guò)渡流動(dòng)相以0.2ml/min流速沖洗安捷倫色譜柱過(guò)夜。
  
  2、梯度條件:用含有緩沖鹽的流動(dòng)相跑梯度之前,用與初始流動(dòng)相組成相同的過(guò)渡流動(dòng)相以1.0ml/min流速沖洗60min,再用該過(guò)渡流動(dòng)相以1.0ml/min沖洗安捷倫色譜柱120min。含緩沖鹽流動(dòng)相的梯度設定應盡量平緩,以避免梯度過(guò)程中緩沖鹽析出。
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